Un experimento fallido con resultados excelentes: inactivación enzimática especie-específica

Abstract

En este artículo se describe un experimento fallido realizado en 1992, que marcó el inicio de una colaboración de más de 20 años del autor con el Dr. Armando Gómez Puyou. Este experimento demuestra cómo la investigación experimental puede generar información a pesar de que no se logren los objetivos con los cuales se diseñaron los experimentos: un caso particular de lo que se conoce como serendipia. En el texto se hace primeramente una breve descripción de la química de la yodación de proteínas con el reactivo cloramina–T. Posteriormente, se describe el uso de la columna de Penefsky que permite separar rápidamente moléculas grandes (como proteínas) de moléculas pequeñas (como los reactivos químicos usados en la reacción de la yodación). El experimento falló por que el yodo radioactivo no se unió a la proteína triosafosfato isomerasa de conejo en presencia de cloramina–T. Sin embargo, como consecuencia de este experimento, el Dr. Gómez Puyou notó que la cloramina–T inactivaba fuertemente la función enzimática de la triosafosfato isomerasa proveniente de conejos pero prácticamente no afectaba en menor grado la función enzimática de la triosafosfato isomerasa proveniente de la levadura. De esta observación surgió un nuevo proyecto: el estudio de la inactivación enzimática especie-específica de la triosafosfato isomerasa, enzima clave en la glucólisis.

This article describes my recollections about an unsuccessful experiment made in 1992, which led to my collaboration of more than 20 years with Dr. Armando Gómez Puyou. Initially, it briefly describes some of the chemistry of protein iodination using chloramine–T. Then it describes the “Penefsky column” for the fast separation of large molecules (like proteins) from small molecules (like the reagents used in the iodination reaction). The unsuccessful experiment was that radioactive iodine did not bind to rabbit triosephosphate isomerase in the presence of chloramine –T. But Dr. Gómez Puyou noticed subsequently that chloramine-T strongly inactivated the enzymatic function of rabbit triosephosphate isomerase and inactivated the same enzyme from yeast considerably less. Our main common research project, which was the species-specific inactivation of triosephosphate isomerase, was born from this observation.